摘要abstract第一章 综述1.1 中粘菌纲的建立与系统进化地位1.2 肤孢虫目的分类系统1.3 肤孢虫目物种的生活史研究1.4 肤孢虫对宿主的危害1.5 本研究的目的和意义第二章 欧洲鳗鲡寄生鳗鲡肤孢虫的物种鉴定与描述2.1 前 ...
   摘要 abstract 第一章 综述 1.1 中粘菌纲的建立与系统进化地位 1.2 肤孢虫目的分类系统 1.3 肤孢虫目物种的生活史研究 1.4 肤孢虫对宿主的危害 1.5 本研究的目的和意义 第二章 欧洲鳗鲡寄生鳗鲡肤孢虫的物种鉴定与描述 2.1 前言 2.2 材料与方法 2.2.1 患病鱼的采集 2.2.2 鳗鲡肤孢虫样品收集 2.2.3 形态学观察 2.2.4 组织病理观察 2.2.5 基因组DNA的提取、扩增、测序与分析 2.3 结果 2.3.1 形态学观察 2.3.2 组织病理观察 2.3.3 SSU rDNA 序列比较与系统发育分析 2.4 讨论 2.5 小结 第三章 我国养殖美洲鳗鲡寄生鳗鲡肤孢虫病原的来源研究 3.1 前言 3.2 材料与方法 3.2.1 分子检测方法的建立 3.2.2 鳗鲡肤孢虫的分子检测 3.3 结果 3.3.1 分子检测方法的建立 3.3.2 鳗鲡肤孢虫的分子检测 3.4 讨论 3.5 小结 第四章 鳗鲡肤孢虫生活史的初步研究 4.1 前言 4.2 材料与方法 4.2.1 发病后幸存的美洲鳗鲡中鳗鲡肤孢虫的分子检测 4.2.2 鳗鲡肤孢虫的人工培养 4.3 结果 4.3.1 发病后幸存的美洲鳗鲡中鳗鲡肤孢虫的分子检测 4.3.2 鳗鲡肤孢虫的人工培养 4.4 讨论 4.5 小结 第五章 结论 参考文献 导师组意见 致谢 作者简历 在读期间科研成果目录 收起▲ 摘要鳗鲡肤孢虫(Dermocystidium anguillae Spangenberg,1975)隶属于中粘菌纲(Mesomycetozoea)、肤孢虫目(Dermocystida),最初从欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla Linnaeus,1758)鳃分离并鉴定。由于鳗鲡肤孢虫的原始描述不完善且缺少分子标记信息,本研究对寄生欧洲鳗鲡的鳗鲡肤孢虫进行了补充描述。近期,本实验室首次发现鳗鲡肤孢虫寄生于我国养殖的美洲鳗鲡(Anguilla rostrata Lesueur,1817)和翘嘴鳜(Siniperca chuatsi Basilewsky,1855),并引起了严重的肤孢虫病。为了探究鳗鲡肤孢虫在我国出现的原因,本研究追溯了我国鳗鲡肤孢虫病原的来源。另外,本研究还初步探索了鳗鲡肤孢虫的生活史。1.欧洲鳗鲡寄生鳗鲡肤孢虫的物种鉴定与描述本研究从欧洲鳗鲡鳃分离了鳗鲡肤孢虫,对其形态特征、组织病理以及分子标记进行了比较分析与补充描述。形态学分析发现,该病原在欧洲鳗鲡的鳃形成圆形或弯曲椭圆形白色孢囊;孢囊内含有大量球形孢子,球形孢子内部有一个大的圆形遮光体,将细胞质和细胞核挤压至细胞边缘。透射电镜结果显示,成熟孢子的横切面呈圆形,其内可见液泡、脂质空泡和细胞核,细胞核轮廓清晰,包含一个明显的圆形核仁;扫描电镜结果显示,球形孢子表面不规则地被蛋白质物质网覆盖,孢子表面呈微颗粒状;组织病理观察显示,孢囊的寄生导致鳃丝变形、鳃小片脱落、炎性细胞浸润。分子序列分析显示,本研究分离的鳗鲡肤孢虫与寄生美洲鳗鲡的鳗鲡肤孢虫的SSU r DNA序列完全一致。2.我国养殖的美洲鳗鲡寄生鳗鲡肤孢虫病原的来源研究为了探究我国养殖的美洲鳗鲡寄生的鳗鲡肤孢虫病原的来源,本研究以SSU r DNA序列为靶标,建立了鳗鲡肤孢虫的特异性分子检测方法。该检测方法具有较高的灵敏性,在100 ng宿主DNA干扰下,可检测到的鳗鲡肤孢虫基因组DNA最低浓度为10-6 ng/μl。利用该检测方法,本研究对鳗鲡的养殖环境(水、底泥)、饲料(开口饵料、商业饲料)以及从美洲进口的美洲鳗鲡玻璃鳗进行了分子检测。检测结果显示,在养殖环境和饲料样品中均未检测到鳗鲡肤孢虫,在进口的美洲鳗鲡玻璃鳗中检测到了鳗鲡肤孢虫,说明我国养殖的美洲鳗鲡寄生的鳗鲡肤孢虫是由进口的美洲鳗鲡玻璃鳗携带进入我国的。3.鳗鲡肤孢虫生活史的初步研究解析鳗鲡肤孢虫的生活史是建立其病害防控方法的重要基础。为了探究美洲鳗鲡玻璃鳗携带的鳗鲡肤孢虫的来源,本研究对发生鳗鲡肤孢虫病幸存的美洲鳗鲡进行了分子检测。检测结果显示,发病后幸存的美洲鳗鲡仍然携带鳗鲡肤孢虫,说明美洲鳗鲡可能将鳗鲡肤孢虫携带至产卵地并传递给子代。为了探究寄生我国翘嘴鳜的鳗鲡肤孢虫病原的来源,本研究对美洲鳗鲡源的鳗鲡肤孢虫进行了人工培养。结果显示,鳗鲡肤孢虫的成熟孢子在淡水环境中可以发育成单鞭毛动孢子,说明寄生翘嘴鳜的鳗鲡肤孢虫可能来源于发生鳗鲡肤孢虫病的美洲鳗鲡向水体中释放的单鞭毛动孢子。 收起▲ 著录项
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